菜籽蛋白酶解及產物抗氧化活性的研究.pdf

1、油菜籽加工油脂過程中的副產品菜籽粕具有廣闊的應用前景，然而由于菜籽粕中硫代葡萄糖苷以及其他一些抗營養因子的存在，使菜籽粕的合理利用受到制約。本文研究了超聲微波輔助提取菜籽蛋白的工藝、雙酶分步酶解制備菜籽肽的工藝、菜籽蛋白酶解物的脫色及分子量分布范圍，同時比較了三種不同分子量的菜籽蛋白酶解物的抗氧化能力，從中選出抗氧化能力較強的菜籽蛋白酶解物進行動物體內實驗的研究。實驗結果如下：
　　 （1）選用雙低菜籽粕為原料，采用超聲微波輔助

2、提取的方法，通過對各種單因素的分析得到基本工藝條件，根據Box-Benhnken的中心組合試驗設計原則，選取對提取菜籽蛋白影響較大的3個因素：微波功率、提取時間和料液比值進行實驗和響應面分析，得到制備菜籽蛋白的最佳工藝條件為：pH為11.5，微波功率73 W，料液比1：28，提取時間484秒，在此條件下提取3次，產品蛋白含量83.67％，蛋白得率38.76％。
　　 （2）實驗選取Alcalase堿性蛋白酶和復合風味蛋白酶分步水

3、解菜籽蛋白，結果表明雙酶分步水解制備菜籽肽的最佳工藝為Alcalase堿性蛋白酶在pH9.5，溫度55℃，底物濃度3％，酶濃度5500u/g條件下酶解5.5小時，水解度為21.14％，再用復合風味酶在pH6，溫度50℃，酶濃度900u/g條件下繼續酶解3小時，酶解液中游離氨基氮達到1.31mg/ml，且酶解液苦味值最低。
　　 （3）研究粗肽液用活性炭脫色得到最佳的脫色條件：活性炭用量1.5％，pH4.5，溫度55℃，脫色50m

4、in，脫色率可達32.15％，氨基酸損失率25.12％。將脫色后的菜籽蛋白酶解物進行高效液相色譜和質譜分析表明：菜籽蛋白酶解物主要是由1000Da以下的小分子肽組成。
　　 （4）通過比較研究三種菜籽蛋白酶解物的抗氧化能力，發現組分3的抗氧化的效果最好，抗氧化能力最強。于是進一步研究菜籽蛋白酶解物（RPHs）對在拘束應激狀態下的小鼠抗氧化作用。48只昆明系小鼠分為4組：空白組、拘束應激模型組、菜籽肽低劑量組和菜籽肽高劑量組?？瞻?/p>