雄激素受體基因、性激素結合球蛋白基因多態性、指長比與PCOS的關聯性研究.pdf

1、背景和目的：多囊卵巢綜合征(PCOS)是育齡期女性常見的一種高度異質性的內分泌代謝紊亂性疾病，臨床表現多種多樣，典型的表現為不同程度的月經異常、卵巢多囊性改變、高雄激素血癥、不孕、多毛、痤瘡、肥胖等，并常伴有隨年齡增長而日益明顯的胰島素抵抗、高胰島素血癥和高脂血癥，常合并2型糖尿病和心血管疾病。迄今為止，PCOS的病因尚不清楚，其明顯的家族聚集性提示遺傳因素在PCOS的發病中起重要作用，由于臨床表現的異質性，多數研究認為:PCOS很可能

2、是少數幾個關鍵基因與微效基因共同作用，這種遺傳易感性與環境因素相互作用而發病的，而且對于不同種族，不同家庭，起關鍵作用的基因可能不同。國外對PCOS的多種基因進行了研究，結果不盡相同，國內對PCOS的致病基因研究不多。國外學者還研究表明指長比有性別、種族和地域差異，與個體攻擊性行為、艾滋病病毒易感性、心肌梗塞、乳腺癌、精子數量、及同性戀等有關，但國內研究較少。
　　本課題針對PCOS常見的高雄激素血癥的內分泌特征，選擇與雄激素有關

3、的雄激素受體(AR)基因和性激素結合球蛋白（SHBG）基因進行研究，旨在探討AR基因微衛星（CAG）n多態性和SHBG基因（TAAAA）n多態性與PCOS發病及臨床特征的關系，尋找PCOS的致病基因，以期為PCOS的預防和治療提供理論基礎。同時研究指長比與PCOS的相關性，以期為國內女性PCOS患者的早期篩選、診斷和預防提供一定的理論依據。
　　方法:收集2008年10月-2010年4月在寧夏醫科大學附屬醫院生殖醫學中心就診的PC

4、OS患者191例作為PCOS組，并與PCOS患者同時期因單純輸卵管因素或男性因素不孕就診的70名女性作為對照組。所有女性均排除其他內分泌疾患，近3月內未使用激素類藥物，行血清性激素水平、空腹血糖、餐后2小時血糖、空腹胰島素、餐后2小時胰島素水平及血脂水平測定。并且記錄月經、痤瘡及脂肪肝的發生情況，測量體重、身高、腰圍、臀圍、血壓、計算體重指數(BMI)、腰臀比、胰島素抵抗(IR)、按照是否存在高雄激素血癥將PCOS患者分為高雄激素組和雄

5、激素水平正常組；按照是否存在胰島素抵抗分為胰島素抵抗組和非胰島素抵抗組；按照BMI分為肥胖組和非肥胖組。對照組測定血清性激素水平及血脂水平。對各指標進行比較。從血液標本中提取DNA，PCR擴增所有標本的雄激素受體AR基因的CAG微衛星片段和性激素結合球蛋白SHBG基因的TAAAA片段，分別進行瓊脂糖凝膠、毛細管電泳檢測目的基因產物，對目的基因測序確定CAG和TAAAA重復次數。測量左右手第2-5指長度（掌側），并計算各手指間的指長比值。

6、
　　結果：1.PCOS患者的臨床資料分析
　　1.1PCOS組于正常對照組比較，兩組的年齡、初潮年齡、收縮壓、舒張壓、FSH、PRL、E2、CHOL、LDL、HDL之間沒有差異,月經周期、腰圍、臀圍、WHR、BMI、痤瘡發生率、LH、T、TG之間有差異，PCOS組均大于正常對照組。
　　1.2PCOS患者高雄激素組和雄激素正常組比較，兩組的年齡、空腹胰島素、空腹血糖、餐后2小時血糖、LH、FSH、PRL、E2均無差異

7、,餐后2小時胰島素、T、BMI有差異，PCOS組均大于正常對照組。
　　1.3PCOS患者胰島素抵抗組與胰島素非抵抗組比較，兩組的年齡、E2、FSH、LH、PRL水平之間沒有差異，而胰島素抵抗組的PCOS患者的T、BMI、WHR和兩個時點的血糖及胰島素水平均高于胰島素非抵抗組的PCOS患者，且差異有顯著性。在高雄激素組中存在胰島素抵抗的患者例數與雄激素正常組中存在的胰島素抵抗的患者的例數有差異，高雄激素組例數高于雄激素正常組例數。

8、
　　1.4PCOS患者肥胖組與非肥胖組比較，兩組患者的年齡、空腹血糖、餐后2小時血糖、E2、FSH、LH、PRL水平之間沒有差異，而空腹胰島素、餐后2小時胰島素、IR、T、BMI、WHR之間有差異，肥胖組均大于非肥胖組。
　　2.AR基因(CAG)n重復次數與多囊卵巢綜合征的相關性研究
　　2.1AR基因（CAG）n重復次數的整體分布:AR-CAG重復次數在PCOS組為11-33，主要分布在22、23、21；在對照組

9、為13-30，主要分布在22、21、23，兩組均以22居多，兩組均以22為界，按AR基因所含CAG重復次數，將其分為短組CAG(n≤22)與長組CAG(n＞22)，兩組基因重復次數相似，無統計學意義。
　　2.2短組與長組AR基因CAG重復在PCOS患者高雄激素組與雄激素水平正常組的分布中短組患者例數高于長組，差異有統計學意義。短組與長組AR基因CAG在PCOS患者胰島素抵抗組和非胰島素抵抗組的分布無差異。
　　3.SHBG

10、基因（TAAAA）n重復次數與多囊卵巢綜合征的相關性研究
　　3.1SHBG基因（TAAAA）n重復次數的整體分布:共有6、7、8、9次重復4個等位基因,未檢測到10次及11次重復。檢測到6/6、6/7、6/8、6/9、6/11、7/7、7/8、7/9、7/10、8/8、8/9、8/10、9/9、9/10共14種基因型,未見6/10、10/10、7/11、8/11、9/11、10/11、11/11基因型。整個群體中,等位基因頻率9

11、＞6＞7＞8,各等位基因分布沒有明顯差異。
　　3.2PCOS患者與對照組SHBG基因等位基因頻率、總基因型分布構成,差異均無統計學意義。PCOS患者胰島素抵抗組與胰島素非抵抗基因型分布的比較布總構成比差異無意義，9／9基因型在胰島素抵抗組中高于胰島素非抵抗組，兩組有差異。
　　4.指長比與多囊卵巢綜合癥相關性研究
　　4.1對照組與PCOS患者組左手指長比均無差異，而右手PCOS組指長比均大于對照組，差異有統計學意義

12、，以2D：4D、2D：5D差異更為顯著。
　　4.2PCOS患者AR基因第一外顯子(CAG)n短組與長組左右手指長比2D：5D、3D：5D差異有統計學意義，短組小于長組，其余左手指指長比均未顯示出差異。右手AR基因第一外顯子(CAG)n短組與長組比較差異無統計學意義。
　　結論：(1)寧夏漢族PCOS患者具有高雄激素血癥、肥胖、胰島素抵抗的內分泌代謝特征，且高雄激素血癥和高胰島素血癥可以相互影響；(2)多囊卵巢綜合征患者存在

13、脂質代謝紊亂，其血脂異常主要表現為TG水平升高；(3)寧夏漢族婦女PCOS患者AR-CAG重復次數與睪酮水平呈正相關，即CAG重復次數越短，AR活性越高，睪酮水平越低；同時較短的CAG重復次數和較高的雄激素水平可影響PCOS患者的高雄表現，兩者具有疊加作用；(4)AR-CAG多態性與高胰島素血癥之間無直接相關性，可能是通過高雄激素血癥間接影響了高胰島素血癥的發生；(5)寧夏漢族婦女SHBG基因啟動子(TAAAA)n重復多態等位基因、基因

14、型及其數目與國外報道不同。9/9基因型(TAAAA)n重復多態可能與PCOS及胰島素抵抗有關；(6)SHBG基因啟動子(TAAAA)n多態性并不是一個造成寧夏漢族PCOS患者發生糖代謝異常的重要的、敏感的遺傳因素和指標。（7）寧夏漢族女性指長比，尤其是右手高的2D：4D和2D：5D可能是PCOS早期發病風險的重要參考指標之一。而右手高的2D:3D可能是PCOS患者高胰島素抵抗的有價值的信息。（8）左手2D：5D、3D：5D與AR基因多態