魯米諾發光體系在生物藥物和食品分析中的應用.pdf

1、本學位論文為魯米諾發光體系在生物藥物和食品分析中的應用，它包括綜述和研究報告兩部分。 第一部分綜述在這部分，主要以2000～2007年有關化學發光分析的文獻為基礎，結合本人的研究工作，簡要綜述了魯米諾-過氧化氫、魯米諾．鐵氰化鉀、魯米諾-碘化物、魯米諾-溶解氧、魯米諾-高錳酸鉀等化學發光體系的反應機理以及應用。 第二部分研究報告發光試劑有很多種，其中魯米諾是最常見的化學發光試劑之一。本研究工作主要以魯米諾為發光試劑，過氧

2、化氫、高碘酸鉀、鐵氰化鉀、溶解氧為氧化劑的基礎上，采用流動注射技術，自行設計了化學發光實驗裝置，完成了對羅紅霉素、多巴胺、克林霉素、蘇丹I、山萘酚等的測定。 1.在藥物分析中的應用(1)羅紅霉素作為一種安全而有效的抗生素，被廣泛應用于一些性傳播疾病、上下呼吸道感染和哮喘、齒齦感染如齒齦炎、胃腸道感染等?；诹_紅霉素能夠增強luminol-H<,2>O<,2>化學發光強度這一現象，建立了測定羅紅霉素的簡單、靈敏、快速的流動注射化學

3、發光法。在優化條件下，測定羅紅霉素的線性范圍為1.0-1000 pg mL<'-1>，相對標準偏差少于5％，測定時的采樣頻率達到每小時120次。該方法已被成功的應用于人體尿液中羅紅霉素含量的監測，在口服兩小時后，它的排出量達到最大值，十二小時內的代謝率為4.6％。本研究工作發表在Cure．Drug Metab，2006，7，389-395。 (2) 多巴胺是一種神經傳遞物質。人體中多巴胺含量的改變可以導致一些重要疾病如神經分裂癥

4、和帕金森氏癥。本文基于多巴胺對 luminol-IO<,4><'->和 luminol-Fe(CN)<,6><'3->化學發光體系的抑制作用為基礎，建立了兩種化學發光測定多巴胺的新方法。實驗表明發光強度的降低值與樣品濃度的對數呈線性關系，檢測范圍分別為 1.0-300 ng mL<'-1>和0.1-10 ng mL<'-1>；檢出限為 0.3 ng mL<'-1>和0.04 ng mL<'-1>；本法成功測定了藥物制劑和人血清中多巴胺的

5、含量。本研究工作已發表在Can．J．Anal．Scl．＆ Spect．，2006，51，59-66；西北大學學報，2005,35，108-109。 (3)克林霉素為一種抗菌素，適用于葡萄球菌、溶血性鏈球菌、肺炎球菌等引起的皮膚軟組織感染、上下呼吸道感染、急慢性骨髓炎等。在luminol-H<,2>O<,2>體系中，克林霉素能夠顯著增強該體系的發光強度，克林霉素的濃度范圍從1.0 pg mL<'-1>到1.0 ngmL<'-1>，

6、相對標準偏差少于3.0％(n=5)，檢出限為0.3 pg mL<'-1>(3σ)。當流速為 2.0 mL min<'-1>時，對克林霉素的測定能在0.5分鐘內完成。該方法被成功的應用于克林霉素膠囊、尿樣和血樣的測定，且回收率為86.2-108.8％。本研究工作已發表在中華醫藥志，2005，6，22-24． 蘇丹Ⅰ是一種紅色的偶氮染料，也是一種工業合成染色劑，用于為溶劑、油、蠟、汽油增色以及鞋、地板等的增光。依據IARC，蘇丹(Ⅰ

7、-Ⅳ)染料被列入第三類致癌物質中，這是因為它能誘發一些動物的肝癌和膀胱癌，并且全球食品法案中都禁止蘇丹Ⅰ添加到食品中?；谔K丹Ⅰ能夠增敏luminol-H<,2>O<,2>化學發光反應，而建立了測定蘇丹Ⅰ的新方法。在優化條件下，對蘇丹Ⅰ檢測的線性范圍為10 pg mL<'-1>-7 ng mL<'-1>，檢出限為3 pg mL<'-1>(3σ)，定量限為7.5 pg mL<'-1>。單次測定所需要的時間為1分鐘，相對標準偏差小于5.0％

8、。本方法已經成功地應用于問題辣椒醬中蘇丹Ⅰ的測定，并用高效液相色譜進行了對照實驗，結果滿意。本研究工作發表在J．Agr．＆ Food Chem．，2007，55，614-617。 (2) 多巴胺是一種神經傳遞物質。人體中多巴胺含量的改變可以導致一些重要疾病如神經分裂癥和帕金森氏癥。本文基于多巴胺對luminol-IO<,4><'->和luminol-Fe(CN)<,6><'3->化學發光體系的抑制作用為基礎，建立了兩種化學發光測

9、定多巴胺的新方法。實驗表明發光強度的降低值與樣品濃度的對數呈線性關系，檢測范圍分別為1.0-300 ng mL<'-1>和0.1-10 ng mL<'-1>；檢出限為0.3 ng mL<'-1>和0.04 ng mL<'-1>；本法成功測定了藥物制劑和人血清中多巴胺的含量。本研究工作已發表在Can．J．Anal Sci．＆ Spect，2006，51，59-66；西北大學學報，2005，35，108-109。 (3)克林霉素為一

10、種抗菌素，適用于葡萄球菌、溶血性鏈球菌、肺炎球菌等引起的皮膚軟組織感染、上下呼吸道感染、急慢性骨髓炎等。在luminol-H<,2>O<,2>體系中，克林霉素能夠顯著增強該體系的發光強度，克林霉素的濃度范圍從1.0 pg mL<'-1>到1.0 ngmL<'-1>，相對標準偏差少于3.0％(n=5)，檢出限為0.3 pg mL<'-1>(3σ)。當流速為2.0 mL min<'-1>時，對克林霉素的測定能在0.5分鐘內完成。該方法被成功

11、的應用于克林霉素膠囊、尿樣和血樣的測定，且回收率為86.2-108.8％。本研究工作已發表在中華醫藥雜志，2005，6，22-24。 蘇丹Ⅰ是一種紅色的偶氮染料，也是一種工業合成染色劑，用于為溶劑、油、蠟、汽油增色以及鞋、地板等的增光。依據IARC，蘇丹(Ⅰ-Ⅱ)染料被列入第三類致癌物質中，這是因為它能誘發一些動物的肝癌和膀胱癌，并且全球食品法案中都禁止蘇丹Ⅰ添加到食品中?；谔K丹Ⅰ能夠增敏luminol-H<,2>O<,2>

12、pg mL<'-1>-7 ng mL<'-1>，檢出限為3 pg mL<'-1>(3σ)，定量限為7.5 pg mL<'-1>。單次測定所需要的時間為1分鐘，相對標準偏差小于5.0％。本方法已經成功地應用于問題辣椒醬中蘇丹Ⅰ的測定，并用高效液相色譜進行了對照實驗，結果滿意。本研究工作發表在 J．Agr．& Food Chem．，2007，55,614-617。 山萘酚，又名黃芪甙元和山萘黃素，是一種類黃酮，廣泛存在于天然植物中，

13、如蘋果、洋蔥、韭蔥、柑橘類的植物、葡萄和銀杏中。山柰酚具有抗癌、抑制生育、抗癲癇、抗炎、抗氧化、解痙、抗潰瘍、利膽利尿、止咳的作用。本文測定了由桃耳七真菌發酵產生的山萘酚，以山萘酚對luminol-H<,2>O<,2>和luminol-dissolved oxygen化學發光體系的增強作用為基礎，建立了兩種靈敏的測定山萘酚的方法。實驗發現，山萘酚的線性濃度范圍分別為7-1000 pg mL<'-1>和10-3000 pg mL<'-1>