原花青素預處理改善全酸蝕粘接系統牙本質粘接耐久性的基礎研究.pdf

1、過去幾十年，隨著牙本質濕粘接技術的應用及粘接材料的不斷更新換代，即刻牙本質粘接效果得到顯著改善。然而，由于牙本質結構的特殊性和口腔環境的復雜性，牙本質粘接修復體的耐久性仍不盡人意。
　　近年來，國內外學者在深入探索牙本質粘接界面老化機制的過程中，提出了許多提高牙本質耐久性的措施，如使用疏水型粘接劑、抗菌粘接劑、乙醇濕粘接技術、酶抑制劑、再礦化等，以期改善粘接界面的封閉性，增強其耐降解能力，從而一定程度的延長粘接修復體的使用壽命。雖

2、然這些嘗試獲得了令人鼓舞的體外實驗室結果，但是仍然存在一些缺陷尚不能達到臨床應用的要求，因此目前還沒有明確的臨床改進方案可以借鑒和采納。
　　I型膠原作為牙本質基質的主要成分，正常情況下依靠其分子間和分子內交聯成為牙本質基質的支架，在維持牙本質粘接界面的穩定中發揮重要作用。近年來，組織工程醫學應用外源性交聯劑改性膠原支架材料，發現外源性交聯劑能進一步促進膠原交聯，提高膠原機械性能以及抗酶解、水解和化學解離等能力而增強其穩定性。由于

3、天然膠原交聯劑較化學交聯劑具有良好的生物學相容性而備受關注。受此啟發，本研究擬選用一種天然膠原交聯劑原花青素，用與市售粘接系統一致的溶劑包括蒸餾水、乙醇或丙酮配制預處理劑，在牙本質酸蝕后、粘接前短暫預處理脫礦牙本質，檢測原花青素預處理對脫礦牙本質機械性能、形貌，樹脂-牙本質即刻粘接強度以及粘接耐久性的影響，并初步探討原花青素與牙本質相互作用的機制，以期為臨床操作中改善全酸蝕粘接系統牙本質粘接耐久性提供新的思路和方法。
　　第一部分

4、：原花青素預處理對脫礦牙本質機械性能和形貌影響的研究
　　將來源于葡萄籽提取物的天然膠原交聯劑原花青素配制成不同溶劑（蒸餾水、乙醇或丙酮）和不同重量體積比濃度（5％、10％或15％）的預處理劑，用其預處理脫礦牙本質，測試預處理后膠原交聯度、極限拉伸強度和微觀形貌的變化。結果顯示，原花青素預處理后，脫礦牙本質膠原交聯度和極限拉伸強度呈濃度和時間依賴性增加，10％、15％原花青素預處理組顯著高于純溶劑預處理空白對照組（P<0.05）。

5、預處理后的脫礦牙本質膠原纖維粗細較均一，比陰性對照組排列有序，且不受表面干濕度的影響而始終保持膨松狀態。不同溶劑預處理組間存在一定的差異，提示不同溶劑對PA活性的發揮可能有一定影響。
　　第二部分：原花青素預處理對樹脂-牙本質即刻粘接性能影響的研究
　　選用目前市場上常用的兩種全酸蝕粘接系統，以水和乙醇為溶劑的AdperTMSingleBond2，以及以水和丙酮為溶劑的Prime&BondNT。用與粘接劑相同溶劑配制的原花青

6、素預處理劑在粘接前預處理脫礦牙本質表面120s，測試樹脂-牙本質即刻粘接強度的改變以及預處理劑對所用粘接劑固化性能的影響。此外，將預處理時間縮短至臨床可操作范圍內60s、30s，評估原花青素短暫預處理能否提高牙本質即刻粘接強度。結果顯示，當用AdperTMSingleBond2粘接時，牙本質即刻粘接強度隨著原花青素預處理劑濃度的增加而升高，10％、15％原花青素水溶劑組和乙醇溶劑組預處理120s，牙本質即刻粘接強度均顯著高于陰性對照組（

7、P<0.05）。而使用Prime&BondNT粘接時，僅15％原花青素水溶劑組和10％原花青素丙酮溶劑組試件粘接強度顯著高于陰性對照組（P<0.05）。因此優選AdperTMSingleBond2粘接系統評估縮短原花青素預處理時間對牙本質粘接強度的影響。結果發現15％原花青素預處理60s組，無論水溶劑組還是乙醇溶劑組，牙本質即刻粘接強度仍顯著高于陰性對照組（P<0.05）；而當預處理時間縮短至30s時，牙本質粘接強度雖高于陰性對照組，但

8、差異無統計學意義（P>0.05）。傅里葉紅外光譜檢測發現，原花青素預處理組與陰性對照組雙鍵轉化率無顯著差異，說明原花青素預處理對受試粘接系統的固化性能無顯著影響。
　　第三部分：原花青素預處理對樹脂-牙本質粘接耐久性影響的研究
　　根據前面兩部分的實驗結果，篩選得出乙醇溶劑配制的10％、15％原花青素預處理處理60s、120s能顯著增加樹脂-牙本質粘接強度，故選用該預處理劑進行老化研究，通過測量冷熱循環和酶降解條件下牙本質粘

9、接強度、膠原降解量、納米滲漏以及粘接界面形貌的變化，評估原花青素預處理是否對樹脂-牙本質粘接界面具有保護作用。結果顯示，經冷熱循環和酶解老化，原花青素預處理組，尤其是15％原花青素預處理120s組的粘接強度仍顯著高于陰性對照組（P<0.05），膠原降解量和納米滲漏程度顯著低于陰性對照組（P<0.05），且粘接界面結構均一、較完整。提示原花青素預處理能保護樹脂-牙本質粘接界面，減緩其溫度老化及酶解老化過程。
　　第四部分：原花青素與

10、牙本質相互作用機制的研究
　　首先用拉曼光譜分析原花青素與牙本質膠原的作用位點，其次，分析原花青素是否能抑制牙源性溶明膠/溶膠原活性，以及是否具有保護膠原免于次氯酸鈉脫蛋白的作用。結果顯示，原花青素預處理促進膠原分子間的交聯、聚集，并且能抑制牙源性溶明膠/溶膠原活性。原花青素預處理還能延緩次氯酸鈉對膠原的降解作用。提示原花青素可能通過以上多個方面的共同作用改善并保護牙本質粘接界面的穩定性。
　　綜上所述，天然交聯劑原花青素預