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文檔簡介
1、海參多糖是海參體壁的重要活性成分之一,包括海參硫酸軟骨素(sea cucumber fucolysated chondroitin sulfate,SC-CHS)和海參巖藻聚糖硫酸酯(sea cucumber fucan, SC-FUC)兩種組分。其中,SC-CHS是一種帶有硫酸酯化巖藻糖支鏈的類硫酸軟骨素,主要由D-N-乙酰氨基半乳糖、D-葡萄糖醛酸和L-巖藻糖組成;SC-FUC是一類主要由巖藻糖組成的直鏈硫酸多糖,結構較為簡單。目前
2、關于海參多糖改善胰島素抵抗活性的報道鮮見,且只停留在表象研究,未對機制進行深入探索。故本論文以海地瓜硫酸軟骨素(Acaudina Molpadioides chondroitin sulfate, AM-CHS)和海地瓜巖藻聚糖硫酸酯(Acaudina Molpadioides fucoidan, AM-FUC)為研究對象,在體內和體外水平系統探討比較了二者抑制脂肪細胞分化和改善胰島素抵抗的作用及機制,主要研究結果如下:
采用
3、傳統雞尾酒法建立3T3-L1脂肪細胞模型,系統研究AM-CHS和AM-FUC抑制3T3-L1前脂肪細胞分化作用及機制。結果顯示,AM-CHS和AM-FUC均能顯著抑制3T3-L1前脂肪細胞的增殖和分化,且對分化早期抑制作用最強。羅格列酮是目前治療IR的代表藥物,但存在增重、肥胖等不良反應,AM-CHS和AM-FUC亦能顯著拮抗羅格列酮促脂質聚積的副作用。RT-PCR結果顯示,AM-CHS和AM-FUC能夠上調Wnt信號通路中關鍵受體Fr
4、z和LRP5mRNA的表達、抑制脂質合成轉錄調控因子PPARγ、C/EBPα和SREBP-1c mRNA的表達、抑制脂質合成酶FAS和GTAP mRNA的表達、不影響脂質分解酶HSL和ATGL mRNA的表達。提示AM-CHS和AM-FUC是通過激活經典的Wnt信號通路從而阻滯生脂效應,AM-CHS效果優于AM-FUC。
采用TNF-α誘導法建立3T3-L1胰島素抵抗細胞模型,系統研究了AM-CHS和AM-FUC改善胰島素抵抗
5、作用及機制。結果顯示,AM-CHS和AM-FUC能夠呈時間劑量依賴效應增強3T3-L1胰島素抵抗細胞在基礎狀態、胰島素刺激狀態和PI3K抑制劑Wortmannin存在狀態下的葡萄糖攝取,且二者與RSG具有協同效應,AM-CHS效果優于AM-FUC。RT-PCR結果顯示,AM-CHS和AM-FUC均能不同程度的促進3T3-Ll胰島素抵抗細胞中IR、IRS1、PI3K、AKT2和GLUT4 mRNA的表達。提示AM-CHS和AM-FUC通過
6、激活PI3K/AKT信號通路達到增強葡萄糖轉運、改善胰島素抵抗的作用。
通過建立2型糖尿病小鼠模型進一步研究了AM-CHS和AM-FUC對胰島素抵抗的改善作用。結果顯示,AM-CHS和AM-FUC可顯著降低2型糖尿病小鼠體重、空腹血糖和胰島素水平,提高血清脂聯素含量,降低抵抗素、瘦素和TNF-α含量,改善胰島素抵抗,且AM-CHS和AM-FUC與RSG具有協同作用。提示AM-CHS和AM-FUC能顯著改善2型糖尿病小鼠的胰島素
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