游離脂肪酸致胰島素抵抗的作用機制.pdf

1、目的該研究利用3T3-L1細胞體外誘導分化為脂肪細胞;同時用密度梯度離心和貼壁培養方法對大鼠MSC進顯影響.FFA以劑量和時間依賴的方式削弱了3T3-L1脂肪細胞胰島素信號行分離培養和表面抗原鑒定,建立體外定向誘導MSC分化為脂肪細胞的方法;并對這兩種通過體外定向誘導分化來得到大量成熟脂肪細胞的方法加以比較,探索以脂肪細胞為模型研究其在內分泌系統的作用的新途徑.該研究還選擇了有代表性的FFA-軟脂酸(palmitic acid,PA)和

2、油酸(oleic acid,OA),觀察不同種類和濃度的FFA對3T3-L1脂肪細胞葡萄糖攝取及胰島素敏感性的影響,建立FFA誘導的胰島素抵抗的細胞模型;并進一步觀察FFA對胰島素信號轉導通路中的關鍵蛋白PI-3K和PKB的蛋白表達和PKB磷酸化水平(p-PKB)的影響、FFA對GLUT4基因表達、蛋白表達及轉位的影響.結論1.3T3-L1細胞可在體外穩定誘導分化為成熟脂肪細胞.2.大鼠MSC穩定表達CD44、CD54、CD106,經體

3、外定向誘導可分化為脂肪細胞.3.FFA以時間和濃度依賴性的方式抑制3T3-L1脂肪細胞胰島素刺激后的葡萄糖特異性轉運,并在高濃度時抑制基礎狀態下的葡萄糖特異性轉運.4.FFA誘導3T3-L1脂肪細胞產生胰島素抵抗,成為胰島素抵抗細胞模型,隨FFA作用時間的延長和濃度的增加,胰島素抵抗的程度加重.5.FFA對3T3-L1脂肪細胞胰島素信號蛋白PI-3K p85α和PKB的蛋白表達無明蛋白PKB的磷酸化水平.FFA導致胰島素抵抗的機制與其影