基于金納米粒子與PCR技術構建電化學生物傳感器的研究.pdf

1、生物傳感器利用生物活性物質（如酶、抗體、核酸、微生物及細胞等）作為識別元件來對各種待測物質進行分析檢測，具有優良的特異性和靈敏度，在醫藥衛生、生物工程、環保等i者多領域都有廣泛的應用。金納米顆粒是生物體系中應用得最為廣泛的納米材料之一。近幾年，將金納米顆粒用于藥物傳輸、腫瘤治療、構建生物傳感器等方面的報道層出不窮。另一方面，PCR技術是現代分子生物學最重要的技術之一，具有特異、靈敏、產率高、快速、簡便、重復性好以及自動化等優點。本論文綜

2、合運用金納米粒子和PCR技術開展了構建分子生物電化學傳感器的研究，取得了一些創新性的結果。
　　 1．腫瘤細胞電化學生物傳感器的研究端粒酶活性幾乎表現在所有惡性腫瘤中，越來越多的研究提示，端粒酶檢測可用于腫瘤的早期診斷。作者首先將端粒酶催化延伸的產物進行PCR擴增，通過將PCR水解后純化的產物固定在石墨電極表面，檢測到了鳥嘌呤的直接電化學信號，并進而運用示差脈沖伏安法，通過石墨電極上鳥嘌呤的電化學信號檢測到端粒中富含鳥嘌呤的重復

3、序列，從而構建了基于端粒酶活性的用于檢測腫瘤細胞的生物傳感器。與此同時，作者將端粒酶的特異性底物序列修飾在金納米粒子表面，在端粒酶的催化下，此序列將延伸，并在鉀離子的存在下形成分子間的四聚體結構，從而引起金納米粒子的聚集，紫外可見光譜表征金納米粒子聚集狀態驗證了上述電化學生物傳感器的檢測結果。本研究的優勢在于不需要使用放射性物質標記，操作過程簡單，能夠在細胞環境中進行檢測，有利于模擬臨床腫瘤細胞檢測的環境，準確而且靈敏度較高。
　

4、　 2．血小板衍生生長因子生物傳感器的研究運用切口核酸內切酶(NEase)的類PCR擴增放大效應以及基于金納米粒子大比表面積的信號放大作用，達到雙重放大檢測PDGF-BB（血小板衍生生長因子）的目的，該檢測方法不僅構建了生物傳感器用于檢測PDGF-BB，而且能夠極大的提高 PDGF-BB檢測的靈敏度，降低PDGF-BB檢測的濃度，檢測限可以達到10nM級別。該研究為檢測低濃度的PDGF-BB提供了一個很好的方法，同時，借助該方法也可用