多溴聯苯醚的生殖發育毒性研究.pdf

1、多溴聯苯醚（Polybrominated Diphenyl Ethers，PBDEs）是新型持久性有機污染物。自Main KM等2007年首次報道隱睪癥患兒的患病率與母乳中PBDEs濃度存在關聯后，針對PBDEs的生殖毒性成為眾多學者關注的研究熱點。
　　目前，關于PBDEs暴露與人類生殖發育之間關系的人群研究資料非常有限。有關PBDEs生殖毒性的動物試驗雖然不斷增多，但針對青春期暴露于PBDEs對雄性生殖系統影響的系統報道較少，

2、且所用染毒劑量遠高于實際生活中人群的暴露水平，缺乏對應于人群暴露水平的低劑量毒性研究資料。
　　針對上述研究不足，本研究首先通過山東某濱海開發區建立的出生隊列，就新生兒PBDEs暴露水平及其影響開展前瞻性研究；然后以人群暴露水平作為劑量參考，建立低劑量染毒動物模型，系統觀察青春期前后低劑量BDE-209暴露對雄性生殖系統發育，特別是精子發育的影響；最后通過建立睪丸生殖細胞體外培養體系，探索PBDEs影響生殖健康的可能機制。

3、　　主要分三部分展開研究：
　　第一部分 某地新生兒多溴聯苯醚暴露水平調查及其生殖發育毒性的研究
　　目的：探討新生兒體內PBDEs暴露水平，分析其暴露與新生兒宮內妊娠結局的相關性。
　　方法：選擇山東省某濱海開發區孕婦作為研究對象，追蹤隨訪孕婦妊娠過程及妊娠結局，同時對新生兒臍帶血血清PBDEs水平進行測定，并對兩者關系進行相關分析。
　　結果：
　　新生兒所有血清樣本（n=176）均能檢測到一種或多種P

4、BDEs同系物。新生兒臍帶血清BDE-100（r=0.607，P<0.01）、BDE-47（r=0.352，P<0.05）、BDE-99（r=0.412，P<0.05）水平與其母親既往懷孕期間因胎兒不正常選擇人工流產呈現明顯的正相關。新生兒血清BDE-153水平與新生兒身長呈顯著正相關（r=0.452，P<0.01）。
　　結論：山東某濱海開發區新生兒體內普遍存在PBDEs暴露，新生兒體內PBDEs水平與其宮內不良妊娠發育結局存在

5、一定的關聯。
　　第二部分 雄性大鼠青春期前后十溴聯苯醚暴露的生殖發育毒性研究
　　目的：探討青春期前后BDE-209暴露對雄性大鼠性發育、生殖器腺發育、精子發育及生殖內分泌功能的影響。
　　方法：24只SD雄性大鼠（4周齡）隨機分為4組，以不同濃度BDE-209（0、2、10、50 mg/kg.d）灌胃染毒，1次/d，連續染毒一個月。染毒結束后，采集樣本并分析。
　　結果：
　　1、與對照組相比，50 m

6、g/kg BDE-209染毒組睪丸抗氧化酶SOD、GSH-Px以及標記酶AKP活性均較對照組明顯下降（P<0.05），睪丸病理切片可見空泡樣變。但各染毒組在體重、肛殖距、陰莖包皮分離時間以及各臟器系數等方面未見明顯改變。
　　2、BDE-209染毒后，精子活力呈現出隨BDE-209濃度增高而明顯下降的趨勢（P<0.05），其中50 mg/kg組精子活力下降最為明顯（P<0.05）。BDE-209染毒組精子運動速率、前進運動精子率較

7、對照組也呈現出下降趨勢，其中50 mg/kg組精子運動速率下降具有統計學意義（P<0.05）。與此同時，BDE-209染毒組的精子畸形率較對照組明顯增高（P<0.05）。但未見BDE-209暴露對精子密度產生顯著性改變。
　　3、BDE-209染毒后，血清睪酮、血清雌二醇、睪丸組織睪酮含量與對照組相比，均未見顯著性改變（P＞0.05）。
　　結論：在本實驗設計劑量下，青春期前后BDE-209暴露對大鼠睪丸的形態功能已產生一定

8、的改變，尤其是對精子分化成熟過程產生了明顯影響，引起精子畸形率增加，精子活力下降，精子運動速率降低。
　　第三部分 體外培養睪丸支持細胞暴露于十溴聯苯醚的毒性研究
　　目的：探討BDE-209對睪丸支持細胞的毒性作用。
　　方法：選用18天齡SD大鼠，取睪丸支持細胞進行原代培養，給予BDE-209染毒24 h，采用MTT法測定細胞濃度，同時利用Annexin V-FITC試劑盒檢測支持細胞的凋亡情況。
　　結果：

9、
　　1、大鼠睪丸支持細胞在培養36h后進入對數增長期，48-72h是適宜的染毒窗口期。不同濃度BDE-209染毒24h后，隨染毒濃度增加，細胞存活率下降，其中當BDE-209濃度≥30μg/ml時，睪丸支持細胞的相對存活率較對照組明顯降低(P<0.05)。
　　2、與對照組相比，BDE-209染毒組支持細胞T-AOC、SOD呈現下降趨勢，其中10、20μg/ml染毒組T-AOC、SOD活性較對照組明顯下降（P<0.05）。