應用蛋白質組學方法篩選乳腺癌相關蛋白質.pdf

1、分類號：學號：2009004／／l丫l／I／Iz／Hl／14t／／l／14／ll／l／。／lll／19llllH8IHll6／l／／ll／泰山壓虧弦碩士學位論文論文題目：應用蛋白質組學方法篩選乳腺癌相關蛋白質作者姓名：侯巍巍學科、專業：病理學與病理生理學。學位類型：科研學位型研究方向：腫瘤方向指導教師：侯剛教授入學時間：2010年9月論文工作起止時間：2011年10月~2013年2月應用蛋白質組學方法篩選乳腺癌相關蛋白質研究生：侯巍巍專

2、業：病理學與病理生理學導師：侯剛教授中文摘要目的本實驗運用雙向凝膠電泳(twodimensionalgelelectrophoresis，2DE)技術、質譜分析(massspectrometry，MS)技術以及生物學信息數據庫搜索等方法，篩選乳腺癌組織與周圍正常乳腺組織之間的差異蛋白，通過比較這些差異表達蛋白譜，尋找和鑒定與乳腺癌相關的蛋白質，深入了解這些蛋白質的結構和功能，篩選出與乳腺癌診斷及預后相關的特異性標志物并為進一步研究奠定基

3、礎。方法選取新鮮乳腺浸潤性導管癌組織及癌旁30cm以外的周圍乳腺正常組織(經病理證實)30例進行雙向凝膠電泳，得到的差異蛋白點用ImageMaster2DPlatinum50圖像分析軟件進行分析，顯示蛋白點強度比值20，說明蛋白點具有表達差異。運用基質輔助激光解吸電離時間飛行質譜分析(matrixassistedlaserdesorptionionization—timeofflightmassspectrometry，MALDI—TO

4、FMS)對所篩選的差異蛋白點做質譜鑒定；根據檢索軟件Mascot計算得到蛋白的分值，分值達到70分以上認為這個蛋白質鑒定可靠；將質譜分析得到的數據輸入NCBI數據庫來獲得蛋白質的信息。結果利用ImageMaster2DPlatinum50凝膠圖象分析軟件對兩樣本總蛋白進行分析，尋找差異蛋白位點，得出結果：浸潤性導管癌組織總共有l0404l5個蛋白位點，癌旁正常乳腺組織共得到了100317個蛋白位點。根據ImageMaster2DPlat