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文檔簡介
1、一、雙水相系統的相圖繪制一、雙水相系統的相圖繪制1.實驗目的了解制作雙水相系統的相圖的方法,加深對相圖的認識。2.實驗原理相圖是研究兩水相萃取的基礎,雙水相形成條件和定量關系常用相圖來表示。圖1是典型的高聚物高聚物水雙水相體系的直角坐標相圖,兩種聚合物A、B以適當比例溶于水就會分別形成有不同組成、度的兩相,上相組成用T點表示,下相組成用B點表示,由圖1可知上下相所含高聚物有所偏重,上相主要含B,下相主要含A。曲線TCB稱為結線,直線TM
2、B稱為系線。結線上方是兩相區,下方為單相區,若配比取在曲線上,則混合后,溶液恰好從澄清變為混濁。組成在系線上的點,分為兩相后,其上下相組成分別為T和B,T、B量的多少服從相圖的杠桿定律。即T和B相質量之比等于系線上MB與MT的線段長度之比。又由于兩相密度相差很小,故上下相體積之比也近似等于系線上MB與MT線段長度之比。圖1AB水雙水相體系相圖Figure1ThephasediagramoftheABH2Oaqueoustwophases
3、ystem3.實驗器材和試劑(1)器材:電子臺秤,漩渦混合器,大試管,滴定管,密度計,溫度計。(2)試劑:聚乙二醇,硫酸銨,硫酸鎂。4.操作方法(1)溶液的配制配制40%的鹽(硫酸銨或硫酸鎂)溶液配制40%的聚乙二醇溶液,液體聚乙二醇可用純溶液。根據相圖,選擇五個成相比例。三、蛋白酶酶活標準曲線的繪制——Folin酚法或紫外分光光度法紫外分光光度法測蛋白酶酶活1原理蛋白酶在一定的溫度與pH條件下,水解酪素底物,然后加入三氯乙酸終止酶反應
4、,并使未水解的酪素沉淀除去,濾液對紫外光有吸收,可用紫外分光光度法測定。根據吸光度計算其酶活力。酶活單位的定義:每1mL粗酶液,在一定溫度和pH值條件下,1min水解酪素產生1ug酪氨酸為一個酶活力單位,以(umL)表示。2試劑和溶液2.1三氯乙酸c=0.4molL:稱取三氯乙酸65.4g,用水溶解并定容至1000mL。2.2氫氧化鈉溶液c(NaOH)=0.5molL2.3鹽酸溶液c(HCl)=1molL及0.1molL1molLHCl
5、:取90mL濃鹽酸溶解于去離子水中,定容至1000mL。0.1molLHCl:取9mL濃鹽酸溶解于去離子水中,定容至1000mL。2.4緩沖溶液a.磷酸緩沖液(pH=7.5)適用于中性蛋白酶稱取磷酸氫二鈉(Na2HPO412H2O)6.02g和磷酸二氫鈉(NaH2PO412H2O)0.5g,加水溶解并定容至1000mL。b.乳酸緩沖液(pH=3.0)適用于酸性蛋白酶甲液稱取乳酸(80%~90%)10.6g,加水溶解并定容至1000mL。
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