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文檔簡介
1、1小鼠小鼠33磷酸甘油脫氫酶(磷酸甘油脫氫酶(GPDHGPDH)酶聯免疫分析酶聯免疫分析試劑盒使用說明書試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用目的:本試劑盒用于測定小鼠血清,血漿及相關液體樣本中3磷酸甘油脫氫酶(GPDH)的活性。實驗原理:實驗原理:本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠3磷酸甘油脫氫酶(GPDH)水平。用純化的小鼠3磷酸甘油脫氫酶(GPDH)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入3磷酸甘油脫氫酶(GPDH
2、),再與HRP標記的3磷酸甘油脫氫酶(GPDH)抗體結合,形成抗體抗原酶標抗體復合物,經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的3磷酸甘油脫氫酶(GPDH)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠3磷酸甘油脫氫酶(GPDH)活性濃度。試劑盒組成試劑盒組成:試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片(4
3、8)2片(96)密封袋1個1個酶標包被板14819628℃保存標準品:1800UL0.5ml1瓶0.5ml1瓶28℃保存標準品稀釋液1.5ml1瓶1.5ml1瓶28℃保存酶標試劑3ml1瓶6ml1瓶28℃保存樣品稀釋液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存顯色劑A液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存顯色劑B液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存終止液3ml1瓶6ml1瓶28℃保存濃縮洗滌液(20ml20倍)1瓶(20ml30倍)1瓶28℃保存樣本處理及要
4、求樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固1020分鐘,離心20分鐘左右(20003000轉分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。2.血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合1020分鐘后,離心20分鐘左右(20003000轉分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(20003000轉分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸
5、腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(20003000轉33各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。4請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(n5)。5封板膜只限
6、一次性使用,以避免交叉污染。6底物請避光保存。7嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.8所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。計算:以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,
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