2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、中山大學本科生科研中山大學本科生科研論文格式要求文格式要求一、一、頁面設置紙型:A4紙型上下邊界:25mm左右邊界:25mm行距:固定值24磅字體:宋體字號:標題四號加粗,正文五號頁碼:暫不設置頁碼二、二、論文格式文格式(中文(中文題目,目,一般不超一般不超過20個字個字)院系名稱(小四號黑體)作者姓名(小四號楷體)指導老師的姓名和職稱:請在學生作者的署名下方另起一行注明。摘要(五號黑體):摘要(五號黑體):(中文,五號仿宋。摘要是科研

2、論文主要內容的簡短、扼要的重述,必須表達論文本身新的、最具特色的內容,重點是結果和結論;.一般以第三人稱的語氣寫,避免用“本文”、“我們”、“本研究”等作為文摘的開頭。)關鍵詞鍵詞(五號黑體):(五號黑體):(中文,五號仿宋,一般選取3~8個詞,每個詞之間應留有空格以區別之。)正文(五號宋正文(五號宋說明:①文內必要的解釋性說明詞語可采用“注釋”形式,其序碼以圓括號放在加注處右上角,內容排在加注處所在頁的頁下,頁下注序碼每頁單獨排序。②

3、表格設計必須清晰、規范,每個表格除有欄頭、表身外還應在表的上方居中標明表序和表題,中間空一格將兩者分開;表隨文放,一般應列在“見表”文字的自然段落的下面,在正文中要明確提及見表;表格一般采用三線表。③插圖要求大小比例適中,數字清晰,照片黑白對比分明;圖也應隨文字放在“見圖”文字的自然段落下面;每幅圖都要有圖序和圖題,通常寫在圖的下方居中位置。④論文內各大部分標題用“一、二┅┅”,次級標題為“(一)、(二)┅┅”,三級標題用“1、2┅┅”

4、,四級標題用“(1)、(2)┅┅”。不再使用五級以下標題。參考文獻(黑體五號,參考文獻(黑體五號,在正文后居中排版在正文后居中排版)一、材料和方法一、材料和方法(一)材料含K5pET22b()重組體的E.coliBL21(DE3)為本室構建并保存;EcI和XbaI為NewEngl公司產品;酵母粉、胰蛋白胨為OXIOD公司產品;IPTG購自北京鼎國生物技術公司;抗生素zeocin為Sigma公司產品,pfuTagDNA聚合酶和質粒pPIC

5、Z?A均購自invitrogen公司,DNA膠回收試劑盒購自NOVAGEN公司,其他試劑為分析純;引物由賽百盛公司合成。(二)聚合酶鏈反應(PCR)擴增K5基因以K5pET22b()重組體為模板,上游引物為:5`CGAATTCCCAGATGTAGAGACTCCTTC3`,5`端設計有EcI的酶切位點;下游引物為:5`CTCTAGAGCGGCACACTGAGGGACATCACA3`,5`端設計有XbaI的酶切位點,建立PCR反應體系:dd

6、H2O38?l,10?pfuBuffer5?l,4?dNTPs4?l,K5primer()0.7?l,K5primer()0.8?l,K5pET22b()1?l,pfuTagDNA聚合酶0.5?l?;靹蚝?,進行PCR反應,反應條件:95℃預變性3m,95℃變性80s,54℃復性100s,72℃延伸2m,循環30次,72℃延伸10m。擴增完畢后,取樣5?l,于1.0%的瓊脂糖凝膠上進行電泳,檢測是否有擴增產物K5基因。(三)K5基因和載體

7、的酶切及酶切產物的純化PCR產物K5DNA片段經酚氯仿抽提、乙醇沉淀純化后,用EcI和XbaI兩種酶同時消化,質粒pPICZ?A同樣用EcI與NotI進行雙酶切,雙酶切體系組成:ddH2O39.5?l,10?Buffer5?l,100?BSA0.5?lDNA2?gEcI1.0?lXbaI1.0?l,總體積50?l。酶切產物按照DNA膠回收試劑盒操作方法進行純化,純化產物經1.0%瓊脂糖凝膠電泳鑒定后,用Genegenuis凝膠分析系統進

8、行DNA相對定量。(四)重組體的構建及轉化純化后的產物在T4DNA連接酶作用下進行連接反應,反應體系:K5DNA8?l,pPICZ?A1.0?l,Buffer2.0?l,T4DNALigase1.5?l,ddH2O6.5?l,總體積20?l。反應液于16℃水浴反應18小時,置于4℃待轉化。然后導入感受態的大腸桿菌DH5?(感受態細胞的制備參見《分子克隆》),涂布于含25?gmlzeocin抗生素的LB板上,37℃過夜培養。(五)陽性菌落

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