共振光散射新方法定量分析蛋白質.pdf

1、共振光散射(RLS)光譜法二十世紀90年代發展起來的一種分析測試新技術。1995年，共振光散射技術作為一種研究生色團聚集的方法被Pasternack正式提出。隨著共振光散射技術在理論和分析方法上的日趨成熟，共振光散射技術以其簡單的操作，較高的靈敏度廣泛應用于蛋白質、核酸、藥物、細胞、金屬離子、非金屬離子、納米粒子和表面活性劑等的分析。共振光散射法與一般的熒光法相比有更高的靈敏度，可以用于稀溶液的研究；檢測更為方便，并可研究共振光散射光譜

2、特征；可為研究分子結構和反應特征提供更豐富的信息；共振瑞利散射對于大分子非鍵作用，如締合、聚集、偶極-偶極作用、長距離組裝非常敏銳，這對于生物大分子的測定、表征及反應歷程的研究極為有利。但是共振光技術還存在著不足之處，譬如抗干擾能力不強，其共振光散射信號易受到外來共存物質的干擾；重現性不好；油溶性試劑中使用不便等。 本論文在總結前人工作基礎上，對共振光散射法測定蛋白質進行了創新性的研究： 1、將自行組裝的流動注射裝置與熒

3、光光譜儀聯用，確立了流動注射.共振光散射聯用測定人血清樣品中蛋白質含量的新方法，提高了共振光散射技術的重現性和穩定性。 2、建立了聚乙二醇辛基苯基醚-蛋白質-亮麗春紅5R三元體系檢測人血清中蛋白質含量的新方法，提高了檢測的靈敏度。 論文共分為三章： 第一章：簡要介紹了共振光散射技術的原理和應用，以及共振光散射分析新方法的發展。并且對實驗中用到的表面活性劑的在共振光散射檢測中的應用進行了簡單綜述。 第二章：

4、用十二烷基硫酸鈉作為探針，在流動注射.共振光散射聯用系統中在線測定人血清中蛋白質的含量。該體系對人血清白蛋白檢測的線性范圍在3.0-28.0μg/mL之間，檢測限為70ng/mL，檢測結果的相對標準偏差不大于2.12％，樣品回收率在97.83-106.09％之間。該方法克服了不穩定體系重現性較差的缺點，分析速度快，靈敏度高，實現了蛋白質的在線檢測。 第三章：基于在pH2.11的酸性溶液中，聚乙二醇辛基苯基醚(OP)對亮麗春紅5R